食用菌菌種怎樣保存和儲藏
來(lái)源：上秋制冷
作者：
發(fā)布時(shí)間：2021-07-08
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一、任務(wù)目的
·熟悉利用低溫、干燥、缺氧等進(jìn)行菌種保藏的原理。
·掌握菌種常用保藏技術(shù)。
二、任務(wù)原理
保藏菌種一般以試管的形式進(jìn)行保存。菌種保藏的基本原理是盡可能地降低菌絲的生理代謝活動(dòng)，使生命活動(dòng)處于休眠狀態(tài)，從而達到菌種保藏的目的。通常采用干燥、
低溫、
冷凍及缺氧、真空等手段進(jìn)行菌種保藏。
三、材料與儀器
母種試管、PDA試管斜面，麥粒、液狀石蠟（裝入三角瓶中，經(jīng)高壓蒸汽滅菌后，40℃干燥箱烘干水分后備用）、濾紙條（裝入培養皿中經(jīng)1.05kg/cm2高壓蒸汽滅菌后備用）、滅菌插菇鐵絲架、無(wú)菌帶棉塞空試管、超凈化工作臺、接種用具、無(wú)菌鑷子、固體石蠟、坩堝、酒精燈、試管架、塑料薄膜、牛皮紙、捆扎繩、標簽、普通冰箱等。
四、任務(wù)實(shí)施
將保藏的母種接入PDA斜面培養基中，待菌絲長(cháng)至斜面的2/3時(shí)，選擇菌絲生長(cháng)粗壯整齊的母種試管，將試管口的棉塞用剪刀剪平。利用酒精燈在坩堝里溶化固體石蠟，用于密封試管口，在外包扎一層塑料薄膜，最后將試管斜面朝下放入4℃冰箱里保存。有效保藏期一般為3～6個(gè)月，最好在2～3個(gè)月時(shí)轉管。如用無(wú)菌膠塞封口的菌種，在冰箱中可保藏3年之久，仍具有很強的生活力。保藏的菌種在使用時(shí)應提前12～24h從冰箱中取出，經(jīng)過(guò)適溫后恢復活力方能轉管。
2.麥粒培養基保藏法
選擇顆粒飽滿(mǎn)、新鮮、無(wú)病蟲(chóng)害的小麥粒，用清水浸泡10h左右，濾干后分裝入試管，容量為試管長(cháng)度的1/3，塞好棉塞，在1.05kg/cm2壓力下滅菌1h，28℃培養24h后，再在1.05kg/cm2壓力下滅菌1h。在無(wú)菌操作下，將要保藏的菌種接入滅菌好的麥粒培養基內。在25℃下培養，菌絲長(cháng)滿(mǎn)培養基后，在無(wú)菌操作下?lián)Q上無(wú)菌膠塞并蠟封，放入4℃左右冰箱內保藏。使用時(shí)，在無(wú)菌操作下，將每支斜面培養基中央接入少量麥粒，培養至菌絲長(cháng)滿(mǎn)斜面即可。采用麥粒培養基作為保藏菌種的培養基，可保藏菌種1年以上。
3.液狀石蠟保藏法
將需要保存的菌種接到培養基上，最好用綜合馬鈴薯瓊脂培養基，在適溫下培養至菌絲長(cháng)滿(mǎn)斜面。然后把液狀石蠟裝于三角瓶中，裝至瓶體1/3處，塞上棉塞，并包紙，另將10mL試管若干支也包裝好，在1.05kg/cm2壓力下滅菌1h，再放入100℃烘箱內干燥1h，以蒸發(fā)其中水分，至石蠟油完全透明為止。將處理好的石蠟油移接到空白斜面上，在28～30℃下培養2～3d，證明無(wú)雜菌生長(cháng)方可使用。然后用無(wú)菌操作的方法把液狀石蠟注入待保藏的斜面試管中。注入量以高出培養基斜面1～1.5cm，塞上橡皮塞，用固體石蠟封口，直立于低溫干燥處保藏。保藏時(shí)間在一年以上，在低溫下，保藏時(shí)間還可延長(cháng)。
五、實(shí)驗報告
（1）結果分析 分析菌種保藏存活率低的原因。
（2）問(wèn)題討論 觀(guān)察結果并對出現的問(wèn)題進(jìn)行分析、討論。
